Kromatogram for hvad det er og typer

den kromatogram er en todimensionel grafisk rekord opnået i et absorberende medium, der viser separation af stoffer ved kromatografi. I kromatogrammet dannes et synligt mønster, toppe eller pletter, som afspejler den fysiske adskillelse af bestanddelene af en blanding.

Den nederste figur er et kromatogram med tre toppe, A, B og C, af tre bestanddele af prøven adskilt ved kromatografi. Det bemærkes, at hver af de tre toppe har forskellig højde og placering i kromatogrammets tidsakse.

Aksen for ordinaterne eller Y registrerer signalstyrkenes information (i millivolts mV i dette tilfælde). Representerer registeret, afhængigt af detektoren, af nogle fysiske egenskaber af stoffet eller den separate bestanddel af blandingen.

Højden af ​​toppen er proportional med koncentrationen af ​​den adskilt komponent af prøven i et optimalt system. Således er det for eksempel let at visualisere, at komponent B er i større forhold end A og C.

På abscissen eller X-aksen er retentionstiden for bestanddelene af prøven eller blandingen repræsenteret. Det er den tid, der går fra indsprøjtningen af ​​prøven, indtil den stopper, idet den er forskellig for hver ren substans.

indeks

• 1 Hvad er et kromatogram for??
  • 1.1 Identifikation af stoffer
  • 1.2 Klassificering af stoffernes renhed
  • 1.3 Kvantificering af stoffer
• 2 typer
  • 2.1 Kromatogrammer på papir eller tynd film
  • 2.2 Kromatogrammer frembragt af detektorer
• 3 referencer

Hvad er et kromatogram for??

Det udgør den endelige rekord af hele kromatografiprocessen. Herved opnås parametre, der er af analytisk interesse. Dette kan opnås som en elektronisk fil, et trykt histogram eller i processtøtten; på papir, for eksempel.

Y-aksen genereres af signaldetektorer eller responsintensitet, såsom spektrofotometre. En optimal analyse af tiden, karakteristika for toppene eller de opnåede pletter er uundværlig; størrelse, placering, farve, blandt andre aspekter.

Analyser af kromatogrammer kræver generelt brug af kontroller eller standarder, identitetsstoffer og kendt koncentration. Analysen af ​​disse kontroller gør det muligt at sammenligne med prøverne, der er karakteristiske for bestanddelene af den undersøgte prøve.

I kromatogrammet kan du observere og analysere, hvordan separationen af ​​komponenterne i en blanding blev udført. Dens optimale undersøgelse gør det muligt at identificere et stof for at demonstrere dets renhed, for at kvantificere mængden af ​​stoffer, der er til stede i en blanding, blandt andre aspekter.

De uddragte oplysninger kan være af kvalitativ art; for eksempel når stoffer identificeres og deres renhed bestemmes. Den kvantitative information er relateret til bestemmelsen af ​​antallet af komponenter af blandingen og koncentrationen af ​​den separerede analyt.

Identifikation af stoffer

Ved at analysere resultaterne af kromatogrammet kan forskellige stoffer identificeres ved at sammenligne tilbageholdelsestiderne med de af de kendte stoffer. Det kan observeres, hvis de undersøgte stoffer rejser samme afstand, hvis de har samme tid som de kendte stoffer.

For eksempel gør kromatogrammet det muligt at opdage og identificere i urinen hos atleterne stofmetabolitter som stimulanter og steroider. Det er en vigtig støtte i undersøgelsen og undersøgelsen af ​​nogle metabolitter produceret af genetiske sygdomme hos den nyfødte.

Kromatogrammet muliggør påvisning af halogenerede carbonhydrider, der er til stede i drikkevand, blandt andre stoffer. Det er uundværligt i laboratorieanalysen af ​​kvalitetskontrol, da det gør det muligt at opdage og identificere de forurenende stoffer, der findes i de forskellige produkter.

Klassificering af renhed af stoffer

I et kromatogram kan du skelne mellem rene og urenheder. Et rent stof ville producere en enkelt top i kromatogrammet; mens et uren stof ville producere to eller flere toppe.

Ved tilstrækkelig tilpasning af de betingelser under hvilke kromatografi udføres, kan to stoffer forhindres i at danne en enkelt top.

Kvantificering af stoffer

Ved at analysere området af toppe af kromatogrammet kan koncentrationen af ​​bestanddelene i prøven beregnes.

Derfor er toppen af ​​toppen proportional med mængden af ​​stoffet, der er til stede i prøven. Disse kvantitative data opnås i særdeles følsomme systemer, såsom dem der frembringer gas- eller væskekromatografi.

typen

En af klassificeringer af kromatogrammerne er nært beslægtet med de forskellige typer kromatografi, som frembringer det tilsvarende chromatogram.

Afhængigt af betingelserne for udførelse af detektorerne vil kromatogrammet blandt andet variere i indhold og kvalitet.

Kromatogrammer på papir eller tynd film

Kromatogrammet kan genereres direkte på papir eller tynd film, der direkte viser fordelingen eller fordelingen af ​​bestanddelene i prøven.

Det er meget nyttigt til adskillelse og undersøgelse af farvede stoffer, der har naturlige pigmenter, såsom klorofyl. Det kan underkastes udviklingsprocesser, hvis stofferne ikke har nogen naturlig farve og er nyttige til kvalitative undersøgelser.

Kromatogrammer frembragt af detektorer

Kromatogrammet kan også opnås ved anvendelse af en detektor, der registrerer chromatografiets respons, udgang eller slutesignal. Som tidligere nævnt er denne detektor normalt et spektrofotometer, et massespektrometer, automatiske sekvenser, elektrokemikalier, blandt andre..

Kromatogrammer, der genereres i kolonner, uanset om de er gasser eller væsker, samt dem med høj opløsning i tyndt lag, brug detektorer.

Afhængig af typen detektor kan kromatogrammet klassificeres som differentieret eller integreret, afhængigt af detektorens responsform.

Differential chromatogram

En differentiel detektor måler kontinuerligt kromatogrammets respons signal, mens integraldetektorer kumulativt måler det tilsvarende signal.

Et differentielkromatogram er et kromatogram opnået ved hjælp af en differentialdetektor. Blandt disse detektorer kan nævnes for eksempel spektrofotometre og detektorer af ændringer i elektrisk ledningsevne.

Denne type kromatogram har vist resultatet af adskillelsen af ​​anioner fra en prøve, detekteret ved indirekte fotometri. Også de samme resultater er opnået til undersøgelsen af ​​ioner, for eksempel med endelig detektion ved ledemetri.

Den øvre graf viser eksemplet på et differentielkromatogram opnået ved hjælp af automatiske DNA-sekvenser (deoxyribonukleinsyre). Grafen viser tydeligt toppe af fire farver, en farve for hver af de DNA-nitrogenholdige baser.

Gennem understøttelsen af ​​et computeriseret program lettes fortolkningen af ​​sekvensen af ​​de analyserede DNA-baser såvel som for mere komplekse analyter..

Omfattende kromatogram

Det integrerede kromatogram svarer til det, der opnås ved hjælp af en integreret detektor. I dette kromatogram er udgangen af ​​en enkelt komponent under undersøgelse vist. Ingen toppe opnås som i differencen.

I det integrerede kromatogram opnås en plade med en form beskrevet som et trin. Denne form er den del af kromatogrammet, der svarer til mængden af ​​et enkelt stof, der forlader søjlen.

referencer

1. Bhanot, D. (2013). Sådan læses til kromatogram? Hentet fra: lab-training.com
2. Carey, F. A. (2006). Organisk kemi Sjette udgave. Mc Graw Hill
3. Kromatografi i dag. (2014). Hvad er et kromatogram? Hentet fra: chromatographytoday.com
4. Mathias, J. (2018). En nybegyndervejledning: Hvordan man tolker gaschromatografi kromatografi Massespektrometri resultater. Hentet fra: innovatechlabs.com
5. Spansk Kromatografisk Samfund og Tilknyttede Teknikker. (2014). Kromatogrammet. Gendannet fra: secyta.es
6. Wikipedia. (2019). Papirkromatografi. Hentet fra: wikipedia.org