Biokemiske testtyper, hvad de er for og betydning



den biokemiske test i mikrobiologi er de et sæt kemiske tests, der udføres på de mikroorganismer, der er til stede i en prøve for at identificere dem; Disse mikroorganismer er sædvanligvis bakterier. Der findes et stort antal biokemiske tests til rådighed for en mikrobiolog.

Valget af disse tests er imidlertid baseret på foreløbige resultater, såsom Gram-firkantmønsteret og væksttegnene, som gør det muligt for bakterierne at blive tildelt til en bestemt kategori. De biokemiske test er hovedsagelig baseret på de metaboliske egenskaber for hver type bakterier. 

Ikke alle bakterier har samme egenskaber, så det undersøges, om de har et bestemt enzym ved at tilføje substratet og vente på, at reaktionen skal forekomme. Almindeligvis er denne bestemmelse givet ved en ændring af farve eller pH i dyrkningsmediet.

Mindre end 15 biokemiske test kræves ofte for pålidelig identifikation af en bakterie op til arteniveauet. At udføre flere biokemiske test kan øge tilliden til identifikation.

De fleste af disse biokemiske test udføres i serum eller blodplasma. Imidlertid kan de også udføres i andre biologiske sekretioner, såsom urin, cerebrospinalvæske, pleuralvæske og afføring..

indeks

  • 1 klassificering
    • 1.1 Universal
    • 1.2 Differentialer
    • 1.3 Specifikke
  • 2 Typer af biokemiske test
    • 2.1 Catalasetesten
    • 2.2 Oxidasetesten
    • 2.3 Test af saltet mannitolagar (MSA)
    • 2.4 koagulasetest
    • 2.5 Urea-testen
  • 3 Hvad er de biokemiske test for??
  • 4 Betydning
  • 5 referencer

klassifikation

De biokemiske test kan klassificeres i 3 grupper:

universel

Dette er de tests, der kan udføres på enhver prøve, og som styrer mikrobiologen om følgende biokemiske test, som skal udføres for at opnå en pålidelig identifikation..

eksempel

Catalase- og oxidasetesten.

differentialer

Disse er de tests, der udføres for at identificere de mikroorganismer, der er til stede i prøven, op til arteniveauet.

Identifikationen er lavet ud fra resultaterne af en kombination af tests, da de individuelle resultater ikke er informative nok til at identificere.

eksempel

IMViC test og sukker brug test.

specifik

De er specifikke tests for et bestemt sæt arter eller subtype en art. Disse prøver udføres normalt for at bekræfte eller identificere på underartsniveau. Individuelle test er oplysende af sig selv.

eksempel

Y-Glutamylaminopeptidase-testen.

Typer af biokemiske test

Catalasetesten

Catalasetesten er en test for at demonstrere tilstedeværelsen af ​​katalaseenzym ved at nedbryde hydrogenperoxid til ilt og vand. En lille mængde bakterier tilsættes til en dråbe hydrogenperoxid (3%) på diaset.

Catalasetesten er en simpel test anvendt af mikrobiologer til at hjælpe med at identificere bakteriearter og for at bestemme nogle mikroberes evne til at nedbryde hydrogenperoxid ved at fremstille katalasenzymet.

Hvis der observeres iltbobler, betyder det at bakterien besidder catalasenzymet, fordi det katalyserer nedbrydning af hydrogenperoxid i ilt og vand. Det siges så, at organismen er katalase positiv (for eksempel: Staphylococcus aureus).

Oxidasetesten

Denne test bruges til at identificere mikroorganismer, der indeholder enzymet cytochromoxidase (vigtigt i elektrontransportkæden). Det er almindeligt anvendt til at skelne mellem familierne Enterobacteriaceae og Pseudomadaceae.

Cytochrome oxidase overfører elektroner fra elektrontransportkæden til oxygen (den endelige elektronacceptor) og reducerer den til vand. Oxidase-test tilvejebringer kunstige elektrondonor- og acceptormolekyler.

Når elektrondonoren oxideres ved hjælp af cytokromoxidase, bliver mediet mørkt lilla og betragtes som et positivt resultat. Mikroorganismen Pseudomonas aeruginosa er et eksempel på en positiv oxidase bakterie.

Saltet Mannitol Agar Test (MSA)

Denne type test er både selektiv og differentiel. MSA vil vælge organismer, der er i stand til at leve i miljøer med høje koncentrationer af salt, såsom arter af Staphylococcus i modsætning til arten af Streptococcus, hvis vækst er hæmmet under disse betingelser.

Differentialkomponenten i denne test er sukker mannitol. Organer, der er i stand til at anvende mannitol som fødevarekilde, vil producere biprodukter af fermentering, som er sure og derfor vil sænke mediumets pH.

Syren i mediet forårsager pH-indikatoren, phenolrød, for at blive gul. Eksempler på bakteriearter, der kan differentieres ved denne metode er: Staphylococcus aureus (positiv fordi det fermenterer mannitol) og Staphylococcus epidermidis (negativ fordi mannitol ikke fermenterer).

Coagulase test

Coagulase er et enzym, der hjælper med at koagulere blodplasma. Denne test udføres på positive gram-positive og katalase-positive bakterier for at identificere Staphylococcus aureus (positiv coagulase) Faktisk er coagulase en virulensfaktor for denne bakterieart.

Dannelsen af ​​blodpropper omkring en infektion forårsaget af denne bakterie beskytter sandsynligvis den mod fagocytose. Denne test er meget nyttig, når du vil skelne mellem Staphylococcus aureus af andre arter af Staphylococcus som er negativ koagulase.

Urea-testen

Denne test bruges til at identificere bakterier, der er i stand til at hydrolyse urinstof ved anvendelse af enzymet urease. Det er almindeligt anvendt til at skelne mellem køn Proteus af andre enteriske bakterier.

Hydrolysen af ​​urinstof producerer ammoniak som et af sine produkter. Denne svage base øger mediumets pH over 8,4, og pH-indikatoren (fenolrød) ændres fra gul til pink. Et eksempel på en positiv urease bakterie er Proteus mirabilis.

Hvad er de biokemiske test for??

Biokemiske test i mikrobiologi bruges til at diagnosticere sygdomme forårsaget af mikrober og overvåge behandlinger administreret til bekæmpelse af dem. Derudover bruges de til screening af infektionssygdomme og til deres prognose..

Biokemisk identifikation af mikroorganismer giver en idé om, hvad disse mikroorganismer er i stand til at være mulig diskrimination mod forskellige stammer af samme art ved specifikke biokemiske profiler.

Forskelle i specifikke enzymatiske aktiviteter informerer om mikroorganismernes økologi, fysiologi eller naturlige habitat, som i nogle tilfælde kan betragtes som vigtig information.

betydning

Strukturelle forskelle med hensyn til form, størrelse og arrangement af bakterier meget lidt hjælp i identifikationsprocessen, fordi der er mange arter af bakterier, der har form, størrelse og indretning lignende.

Af denne grund er identifikationen af ​​bakterier i sidste ende baseret på forskellene i deres biokemiske aktiviteter.

Hver bakterieart har et veldefineret sæt af metaboliske aktiviteter, der er forskellige fra alle andre arter. Disse biokemiske "fingeraftryk" er egenskaber kontrolleret af bakterielle enzymer.

Således er biokemiske test vigtige, fordi de hjælper forskeren til korrekt at identificere de patogener, der er til stede i en prøve, og på den måde at kunne anbefale den passende behandling til patienten..

referencer

  1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Klinisk biokemi (8. udgave). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Biokemiske metoder til bakteriologi. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Klinisk biokemi (5. udgave). Elsevier Health Sciences.
  4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Praktisk håndbog om mikrobiologi (2. udgave). CRC Tryk.
  5. Harrigan, W. (1998). Laboratoriemetoder i fødevarebiologi (3. udgave). Academic Press.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktisk mikrobiologi. BI Publications Pvt Ltd.