Hvad er Simple Staining? Top funktioner

den enkel farvning er en hurtig og enkel farvningsprocedure, hvor der anvendes et enkelt farvestof, derfor kaldes det simpelt. Det anvendes hovedsagelig til at bestemme morfologi og organisering af celler, der er til stede i en prøve.

Naturligvis har cellerne ikke farve, så det er nødvendigt at gøre dem synlige på en eller anden måde, når de observeres i mikroskopet.

Det er vigtigt at understrege, at de farvestoffer, der anvendes ved simpel farvning, skal være basale med positiv ladning (kationisk), således at de spontant kan binde til cellevæggen og cytoplasmaen.

Disse cellulære strukturer er negativt ladede. Derfor er farvestoffet, positivt ladet, tiltrukket af cellerne og binder dem spontant. Således farves alle celler, der er til stede i en prøve, hurtigt.

Farvestoffer anvendt i simpel farvning

Der findes flere grundlæggende farvestoffer, der kan bruges i mikrobiologilaboratoriet. De mest anvendte er:

- Methylenblå.

- Krystal violet.

- Malakitgrøn.

- Grundlæggende fuchsin.

Alle disse farvestoffer virker godt i bakterier, fordi de har positivt ladede (kationiske) farvede ioner (chromophorer).

Farvningstiderne for de fleste af disse farvestoffer er relativt korte. De spænder sædvanligvis fra 30 sekunder til 2 minutter afhængigt af farvestoffets affinitet.

Det er vigtigt at huske på, at det, før du farver en prøve ved simpel farvning, skal forlænges og fastgøres til glasskinnen (dias); Den udvidede og faste prøve kaldes et smear.

De 6 trin til at udføre en enkel farvning

Trin 1

Placer diaset på et farvestativ og anbring det ønskede farvestof. Forlad den tilsvarende tid.

Normalt tager enkel farvning et par sekunder eller et par minutter afhængigt af den anvendte farve.

Observation

I dette trin er det vigtigt ikke at overskride den anbefalede tid for det anvendte farvestof, da krystaller kunne danne sig på arket, hvilket producerer, hvad der er kendt som "artefakter", der forvrider cellernes morfologi.

Trin 2

Vask forsigtigt glidens smøre med destilleret vand fra en flaske eller med vandhaner, der strømmer langsomt, indtil afløbene bliver gennemsigtige. Dette tager normalt 5 til 10 sekunder.

observation

Påfør ikke vandstrømmen direkte på smøret for at forhindre, at kraften fra det samme beskadiger prøven.

Hvis du ikke har destilleret vand, kan du bruge vand fra ledningen uden problemer, da det ikke påvirker farvningsresultatet.

Trin 3

Tør lysbildet med absorberende papirhåndklæder i en retning og uden gnidning. Sørg for, at bunden af ​​lysbilledet er rent.

Trin 4

Overhold det farvede smear i mikroskopet. Start med de fjerneste mål for korrekt at lokalisere det område, du vil observere mere detaljeret. Skift mål for at komme tættere på og tættere på prøven.

observation

Til brug af linsen med den højeste forstørrelse (normalt 100X) skal der anvendes nedsænkningsmiddel, da det hjælper lyset til at trænge ind bedre og billedet bliver skarpere. Det er ikke nødvendigt at bruge et dækslip.

Trin 5

Endelig kassere alle prøver i en passende beholder, der er korrekt mærket som "biohazard".

referencer

1. (2001). Mikrobiologiske anvendelser: Laboratoriehåndbog i generel mikrobiologi (8 ^th red.). McGraw-Hill Companies.
2. Harisha, S. (2006). En introduktion til praktisk bioteknologi (1^st). Firewall Media.
3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D. P. (2009). Preliminær farvning af bakterier: Simple pletter. Nuværende protokoller i mikrobiologi, (SUPPL 15), 1-5.
4. Pommerville, J. (2013). Alcamos laboratoriegrundlag for mikrobiologi (10^th). Jones & Bartlett Learning.
5. Prescott, H. (2002). Laboratorieøvelser i mikrobiologi (5 ^th). McGraw-Hill Companies.
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Principper for mikrobiologi (1^st). Tata McGraw-Hill Education.